樣品的前處理是農(nóng)藥殘留量檢測(cè)過(guò)程中重要的步驟之一,它對(duì)保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,減少對(duì)色譜柱和檢測(cè)儀器的污染,提高檢測(cè)效率都具有重要的影響。
食品中農(nóng)藥的殘留量一般在10-6~10-9(W/W)或更低的水平,除了要求檢測(cè)方法具有相當(dāng)高的靈敏度和選擇性外,也對(duì)樣品的前處理技術(shù)提出了更高的要求。不同的前處理技術(shù)有其各自的優(yōu)缺點(diǎn)和適用范圍,在實(shí)際工作中,應(yīng)根據(jù)待測(cè)樣品種類(lèi)和基質(zhì)、測(cè)定結(jié)果要求和檢測(cè)儀器的不同,并結(jié)合實(shí)際條件選用合適的樣品前處理方法。
常用農(nóng)殘檢測(cè)前處理步驟:
【試劑配制】
① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500ml 蒸餾水中,溶解、混勻即可。
② 底物:往標(biāo)注為底物的瓶中加入10.3ml蒸餾水。2~4oC環(huán)境下冷藏保存。
③ 顯色劑:往標(biāo)注為顯示劑的瓶中加入26ml的緩沖液,輕搖使完全溶解。
④ 酶試劑:酶試劑已配成溶液可直接使用。平常要在2~4oC環(huán)境條件下冷藏保存。
以上試劑不使用時(shí),需放在2~4oC環(huán)境條件下冷藏保存;使用時(shí),從冰箱取出,放置室溫后進(jìn)行檢測(cè)。
【操作方法】
1)空白對(duì)照測(cè)試:
取一比色瓶,用相應(yīng)的移液器吸取對(duì)應(yīng)的試劑,并按以下順序依次向比色瓶加入:加酶100ul-加2.5ml緩沖液-加顯色劑100ul-加底物100ul
將比色瓶搖晃5次左右,倒入比色皿。
2)樣品測(cè)試:
稱(chēng)取2.0g樣品(大小1cm見(jiàn)方即可)放入樣品杯中,加入10mL緩沖液后,振蕩提取2分鐘;過(guò)濾,濾液即為樣品提取液。
取另一比色瓶,用相應(yīng)的移液器吸取對(duì)應(yīng)的試劑,并按以下順序依次向比色瓶加入:加酶100ul-加2.5ml提取液-加顯色劑100ul-搖勻靜止10分鐘-加底物100ul
將比色瓶搖晃5次左右,倒入比色皿。將比色皿放入指定的通道
未來(lái)農(nóng)藥殘留量檢測(cè)的樣品前處理技術(shù)的發(fā)展方向應(yīng)該是盡可能的快速、精確、環(huán)保和高度自動(dòng)化,以盡可能的避免樣品轉(zhuǎn)移的損失,減少各種人為因素的偶然誤差。