甜蜜素已廣泛應(yīng)用于食品加工業(yè)、制藥業(yè)、農(nóng)業(yè)等。它在食品加工中具有良好的穩(wěn)定性,可以代替蔗糖或與蔗糖混合使用,能保持原有食品的風(fēng)味,并能延長食品的保存時間;在醫(yī)藥上可做矯味劑,替代蔗糖,消除人體攝取過多蔗糖產(chǎn)生的許多不良后果,如引起肥胖癥、冠心病、高血壓、糖尿病、齲齒等疾??;可作為糖尿病患者的甜食;在農(nóng)業(yè)中用于蘋果、梨、蕃茄等農(nóng)作物,以增加果實甜味,縮短果實成熟期,是很有發(fā)展前途的果實催熟劑。
在實際中超量超范圍使用,時有發(fā)生,必須加強對其了解和檢測。目前國內(nèi)外食品中甜蜜素含量的檢測方法主要有:氣相色譜法、比色法、薄層色譜法、高效液相色譜法、離子色譜法、單掃描極譜法:
1. 氣相色譜法
氣相色譜法測定甜蜜素是國標(biāo)中的第一法,測定原理是用亞硝酸鈉分解食品中的甜蜜素,產(chǎn)生的環(huán)己醇在硫酸介質(zhì)中與亞硝酸鈉作用,生成環(huán)己醇亞硝酸酯,該物質(zhì)在氫火焰中有良好的響應(yīng)值,以保留時間定性、峰高定量。因測定需先提取甜蜜素后才能進(jìn)行亞硝化衍生,眾多研究者對樣品前處理進(jìn)行了大量的研究并提出不少改進(jìn)方法。
2. 比色法
甜蜜素僅有微弱的紫外吸收,故不宜直接用紫外檢測,需要進(jìn)行衍生反應(yīng)后,才能進(jìn)行紫外測定。常用的衍生方法是重氮化和氯化。比色法是國標(biāo)中第二法,利用甜蜜素在硫酸介質(zhì)中與亞硝酸反應(yīng),生成環(huán)己醇亞硝酸酯,與磺胺重氮化后再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紅色染料,在550nm波長測定其吸光度。
3. 薄層色譜法
薄層色譜法是國標(biāo)中第三法。在聚酰胺薄層板上點樣10μL,置于正丁醇∶氨水∶無水乙醇(7 ∶1 ∶2)展開液中展開,取出自然揮干,噴溴甲酚紫顯色,比移值Rf為0.75,與標(biāo)準(zhǔn)系列比較,可得樣品含量;并指出國標(biāo)方法點樣體積3μL滿足不了測定需要,而導(dǎo)致測定誤差,實驗證明點樣最低不應(yīng)小于4μL。
4. 高效液相色譜法
目前報道的高效液相色譜法測定食品中甜蜜素多采用直接測定或用柱前衍生(常用試劑如次氯酸鈉、亞硝酸鈉、2,4,6一三硝基苯磺酸),在反相柱中被不同洗脫劑洗脫,用紫外、示差折光、質(zhì)譜、間接光度法等檢測器檢測。
5. 離子色譜法
離子色譜法測定甜蜜素主要采用電導(dǎo)檢測。采用IonPacAS11 -HC分析柱,堿性甲醇作淋洗液,樣品經(jīng)Carrez試劑沉淀處理,過濾后進(jìn)樣,同時分析食品中的甜蜜素和苯甲酸。
6. 單掃描極譜法
用三電極系統(tǒng),在氨性底液中,-0.38V (vs.SCE)處測量甜蜜素的二階導(dǎo)數(shù)極譜波,以峰電位定性,峰高定量,計算樣品中甜密素的含量。
7. 其它
對甜密素產(chǎn)品雜質(zhì)質(zhì)量控制也很重要。有研究對產(chǎn)品中的硫酸鹽和干燥失重的關(guān)系進(jìn)行了探討;還有研究對甜蜜素透明度的控制做了理論說明;采用分光光度法,三氯甲烷為萃取劑,酸性溴酚藍(lán)顯色,在410nm下測定了甜蜜素中雙環(huán)己胺;以十四烷為內(nèi)標(biāo)物,二氯甲烷為溶劑,氣相色譜法對國產(chǎn)甜蜜素中的雜質(zhì)苯胺進(jìn)行了測定。
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